前言：本站為你精心整理了腦脈通總蒽醌含量測定醫(yī)學范文，希望能為你的創(chuàng)作提供參考價值，我們的客服老師可以幫助你提供個性化的參考范文，歡迎咨詢。

【摘要】目的建立腦脈通中大黃總蒽醌含量測定方法。方法利用大黃蒽醌類化合物能與質(zhì)量分數(shù)0.5%醋酸鎂反應顯色,在波長512nm處產(chǎn)生吸收，采用可見分光光度法測定腦脈通復方中的以游離型蒽醌計的總蒽醌的含量。結果以1,8二羥基蒽醌為對照品，測得腦脈通有效部位中總蒽醌的含量在10%以上，平均回收率為102.91％，RSD=0.97％。結論本方法簡便、準確、重復性好，可作為腦脈通有效部位中大黃總蒽醌的含量測定方法。

【關鍵詞】比色法；腦脈通；總蒽醌

腦脈通由大黃﹑川芎﹑葛根等組成，具有解毒降濁﹑益氣活血﹑滌痰開竅﹑瀉下之功。該方治療腦梗死效果明顯，可明顯改善生活質(zhì)量，對腦缺血再灌注損傷有明顯的保護作用［1，2］。

我們采用大孔吸附樹脂純化工藝并結合藥效學實驗純化腦脈通，并得到有效成分含量高，雜質(zhì)含量少的有效部位［3，4］。根據(jù)復方有效部位及其主要化學成分的研究分析,確定腦脈通有效部位中的蒽醌類成分為其有效成分之一。目前總蒽醌的含量測定方法主要是比色法。本研究建立一個簡便可靠的腦脈通總蒽醌的含量測定方法，可有效控制腦脈通有效部位的質(zhì)量。

1儀器與試藥

儀器：METTLERAE240型1/100000電子分析天平（瑞士梅特勒公司），RE52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），KQ100型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，UV2201SHIMADZU型分光光度計（日本島津）。

材料：大黃、人參、葛根、川芎藥材均購自河南鄭州藥材批發(fā)市場，經(jīng)河南中醫(yī)學院生藥學科的陳隨清教授鑒定分別為蓼科植物掌葉大黃RheumpalamatumL.的干燥根及根莖，五加科植物人參RadixginsengC.A.Mey.的干燥根及根莖，豆科植物野葛Puerarialobata(Wild.)Ohwi的干燥根，傘形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.干燥根莖。1，8二羥基蒽醌對照品購自中國藥品生物制品檢定所。醋酸鎂、甲醇等均為分析純。

2方法與結果

2.1溶液的制備

2.1.1對照品溶液的制備精密稱取1，8二羥基蒽醌0.01009g，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻即得。

2.1.2供試品溶液的制備精密稱取有效部位樣品10mg至圓底燒瓶中，加冰醋酸25%鹽酸（體積比18∶2）20mL［3］,溫水浴水解45min，冷卻，移入分液漏斗中，三氯甲烷萃取至三氯甲烷層近無色，棄去水層。合并三氯甲烷液，用蒸餾水洗至水層近無色，三氯甲烷層移入蒸發(fā)皿中水浴蒸干，甲醇定容至10mL容量瓶中，即得。

2.1.3陰性樣品溶液的制備按全方比例分別稱取除大黃外其他藥材適量,按有效部位制備工藝制得缺大黃的陰性樣品,按“2.2”項方法制得陰性樣品溶液。

2.2檢測波長的選擇

精密吸取對照品溶液2mL，置25mL容量瓶中，加質(zhì)量分數(shù)0.5%醋酸鎂甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。供試品溶液1mL置10mL的容量瓶中，加質(zhì)量分數(shù)0.5%醋酸鎂甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。按供試品顯色方法制得陰性對照溶液。將上述溶液置于紫外分光光度計中，以質(zhì)量分數(shù)0.5%醋酸鎂甲醇溶液為空白參比溶液，400～800nm范圍內(nèi)掃描測定吸收光譜。1，8二羥基蒽醌對照品溶液加質(zhì)量分數(shù)0.5%醋酸鎂甲醇顯色后的最大吸收波長為512nm，供試品溶液在相同波長處有最大吸收，陰性供試品無干擾。見圖1。

2.3顯色穩(wěn)定性的考察

取顯色后的對照品溶液和供試品溶液，分別放置0、0.5、1、2、4h后，于512nm處測定其吸光度。結果吸光度的RSD值分別為0.75%和0.47%，表明對照品和供試品溶液顯色后4h內(nèi)基本穩(wěn)定

2.4標準曲線制備

精密吸取對照品溶液(0.1009mg·mL-1)0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL置25mL容量瓶中，用質(zhì)量分數(shù)0.5%醋酸鎂甲醇稀釋至刻度，分別于512nm處測定吸光度。以1，8二羥基蒽醌對照品質(zhì)量濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線，并進行線性回歸，得到回歸方程：ρ=0.176+18.992A（r=0.9992）。結果表明，1，8二羥基蒽醌在2.018～16.144μg·mL-1范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關系。

A.1,8二羥基蒽醌；B.供試品溶液;C.陰性樣品

圖1紫外吸收光譜圖（略）

Fig.1UVspectrogram

2.5精密度試驗

精密吸取對照品溶液(0.1009mg·mL-1)2mL置25mL容量瓶中，用質(zhì)量分數(shù)0.5%醋酸鎂甲醇稀釋至刻度，于512nm處連續(xù)測定6次，記錄其吸光度，結果表明，該方法的精密度良好。

2.6穩(wěn)定性試驗

取有效部位樣品10mg，精密稱定，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，分別于配制溶液后0、1、2、3、4、6h顯色測定其吸光度，計算含量的RSD值為1.01%，表明樣品溶液在6h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7回收率試驗

取同一批有效部位樣品5份，每份約5mg，精密稱定，分別精密加入質(zhì)量濃度為0.55mg·mL-1的對照品溶液1mL，蒸干后按“2.2”項下方法制備供試品溶液，最后定容至10mL的容量瓶中。精密吸取供試品溶液1mL置10mL的容量瓶中，搖勻，即得。5份樣品分別顯色后于512nm處測定吸光度，計算含量，總蒽醌的平均回收率為102.91%，RSD=0.97%。

2.8重復性試驗

取同一批有效部位樣品5份，每份約10mg，按“2.2”項下方法制備，分別顯色后于512nm處測定吸光度，計算含量，結果表明,該方法的重復性良好。

2.9樣品含量測定

取3批有效部位樣品各5份，每份約10mg，精密稱定，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，最后定容至10mL的容量瓶中。精密吸取供試品溶液1mL置10mL的容量瓶中，加質(zhì)量分數(shù)0.5%醋酸鎂甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。分別于512nm處測定其吸光度，計算樣品的含量。結果見表1。

3討論

3.1《中國藥典》2005年版一部中，大黃樣品的制備采用的是8%的鹽酸水解［5］，而在實驗過程中發(fā)現(xiàn)采用此方法測定含量有些偏低，因此我們對酸水解條件進行了篩選，選擇了鹽酸、硫酸、鹽酸與冰醋酸的混合酸進行對比研究，由測定結果可知，采用鹽酸與硫酸水解方法所測定的含量偏低，故選擇鹽酸與冰醋酸混合酸作為水解的方法。

表1樣品含量測定結果（略）

Tab.1Resultsofsamplesdetermination(n=5)

3.2本文建立了腦脈通有效部位中總蒽醌的含量測定方法，并進行了方法學考察試驗研究，結果表明符合定量分析要求。該方法重復性、精密度、穩(wěn)定性良好，而且操作簡便，分析快速，可作為腦脈通有效部位質(zhì)量控制方法之一。3批樣品含量測定結果，固化物中總蒽醌的含量均高于10%。

【參考文獻】

［1］任小巧,李建生,封銀曼,等.腦脈通對老齡大鼠腦缺血/再灌注損傷腦保護作用的研究［J］.中國中藥雜志,2004，29(1):66-68.

［2］李建生,鄧西方,任小巧.腦脈通對老齡大鼠腦缺血再灌注細胞因子的影響［J］.中國醫(yī)藥學報，2004,19(8)：471.

［3］王淑美，馮素香，梁生旺，等.高效液相色譜法測定腦脈通有效部位中蒽醌類成分的含量［J］.中國新藥與臨床雜志，2007，26（3）：171-174.

［4］王淑美，馮素香.腦脈通有效部位中總生物堿的含量測定［J］.廣東藥學院學報，2008，24（1）：1-3.

［5］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部［S］.北京：化學工業(yè)出版社，2005：17.